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一种人工栽培血红牛肝菌的方法与流程，贵州鸿富鑫生态农业科技有限公司_专注于;农村种植什么挣钱,桑黄种植技术,赤松茸种植技术,羊肚菌种植技术,西南食用菌研究所,液体菌种制作技术,食用菌种植技术,食用菌种植技术培训学校,西南农业科技研究所,中药材种植,中药材种苗供应,中药材种植技术。
本发明属于食用真菌栽培
技术领域：
，具体涉及一种人工栽培血红牛肝菌的方法。
背景技术：
：血红牛肝菌(BoletusrubellusKrombh.)又名朱红牛肝菌，为担子菌纲，伞菌目(Agaricsles)，牛肝菌科(Boletaceae)，牛肝菌属(Boletus)的一种食用真菌。主要分布于我国云南、四川、吉林、辽宁等地。该菌子实体中等大，菌盖扁半球形至稍平展，血红色至紫褐红色，有细绒毛或有龟裂，直径4-10cm，初期盖缘内卷。菌肉白至带黄色，靠近表皮下带红色，伤变蓝绿色，味柔和。菌管在菌柄处直生或稍延生，老后变暗黄色，伤变蓝绿色，管口角形或近圆形，直径0.5-1mm。菌柄近柱形，长36cm，粗0.6-1.6cm，黄色，下部红褐色，基部稍膨大，黑褐色，顶部有网纹，内实。孢子印黄褐色，孢子淡黄色，平滑，长椭圆形，10.5-13μm×4-4.5μm。管侧囊体梭形，30-55μm×7-9.5μm。血红牛肝菌属于树木的菌根菌，可与云杉、松、栎等树木形成外生菌根。富含麦角甾醇，过氧化麦角甾醇及麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮，其结构类型分别属于吡嗪类、酚类和甾体类化合物，具有抗菌、消炎、杀虫、抗肿瘤、抗补体、免疫抑制、抗流感病毒、抗昆虫等生物活性，药用价值高，是提取药用生物活性物质的优选原料，但目前仅有少量有关其形态及化学成分的报道，尚无人工栽培方面的研究。技术实现要素：为解决现有技术中存在的上述问题，本发明的目的在于提供一种人工栽培血红牛肝菌的方法，以期为药用生物活性物质的提取提供充足的原料。
为实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：一种人工栽培血红牛肝菌的方法，包括以下步骤：(1)培养基质配制，所述培养基质含有以下重量份比的原料：板栗木屑40-60份，玉米粉20-30份，黄沙土20-30MgSO4·7H2O0.6-1.6份，CaCO30.8-1.4份，KH2PO40.5-1份，甘草提取液6-10份；所述培养基质pH为4.8-5.8；(2)接种、养菌，将血红牛肝菌菌种接种于步骤(1)已灭菌的培养基质中，保持温度20-25℃、湿度75-85％、CO2浓度900-1200PPm，遮光培养至培养基质上长满菌丝；(3)覆土，于摇床上按1:2-4的比例振荡混合黄沙土和菜园土，同时喷洒水使土壤水分含量达70-80％，堆放8-12d后覆盖于步骤(2)长满菌丝的基质上；(4)覆土层菌丝培养，覆土后保持温度20-25℃、湿度80-90％、CO2浓度1300-1800PPm，遮光培养至菌丝长至覆土层表面；(5)出菇培养，保持温度23-25℃、湿度80-90％、CO2浓度600-800PPm，光照6-9h/d，光照强度800-1200lx，直至出菇采收。在其中一个实施例，所述方法步骤(3)土壤中还含有20-30％香蕉皮浆。在其中一个实施例，所述香蕉皮浆是通过以下方法制备所得：取粉碎的香蕉皮，加入8-12％的高粱，挤压膨化后接种6-8％酵母菌，发酵2.5-3.5d即得香蕉皮浆。在其中一个实施例，所述方法步骤(1)的甘草提取液为乌拉尔甘草提取液、光果甘草提取液或胀果甘草提取液。在其中一个实施例，所述方法步骤(1)甘草提取液的提取方法为：将甘草药材粉碎成粗粉，用8-10倍量90-95％乙醇浸泡3-5h，回流提取2-4次，每次3-4h，过滤，合并提取液即可。血红牛肝菌生长的碳源物质以葡聚糖、淀粉、果胶效果最好，硫胺素更是其生长所必不可少的，本发明在血红牛肝菌培养基质中加入甘草提取液，其丰富的皂苷(多以葡萄糖糖苷的形式存在)可以促进菌丝的生长，缩短菌丝的生长周期；另外，在土壤中加入香蕉皮浆，因香蕉皮中含有大量的果胶、维生素，尤其维生素B1，不仅为血红牛肝菌的生长提供充足的营养，而且可以提高菇体内脂肪酸的含量。与现有技术相比，本发明的有益效果为：首次提供人工栽培血红牛肝菌的方法，栽培周期短；原料简单，成本低；栽培所得血红牛肝菌脂肪酸含量高；为血红牛肝菌的规模化栽培奠定基础；有望为药用生物活性物质的提取提供充足的原料。具体实施方式为使本
技术领域：
的技术人员能更好地理解本发明的技术方案，下面结合实施例对本发明技术方案进行详细说明。下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。实施例1(1)培养基质配制，所述培养基质含有以下重量份比的原料：板栗木屑40份，玉米粉20份，黄沙土20份，MgSO4·7H2O0.6份，CaCO30.8份，KH2PO40.5份，乌拉尔甘草提取液6份；所述培养基质pH为4.8；(2)接种、养菌，将血红牛肝菌菌种接种于步骤(1)已灭菌的培养基质中，保持温度20℃、湿度75％、CO2浓度900PPm，遮光培养至培养基质上长满菌丝；(3)覆土，于摇床上按1:2的比例振荡混合黄沙土和菜园土，同时喷洒水使土壤水分含量达70％，堆放8d后覆盖于步骤(2)长满菌丝的基质上；(4)覆土层菌丝培养，覆土后保持温度20℃、湿度80％、CO2浓度1300PPm，遮光培养至菌丝长至覆土层表面；(5)出菇培养，保持温度23℃、湿度80％、CO2浓度600PPm，光照6h/d，光照强度800lx，直至出菇采收。实施例2(1)培养基质配制，所述培养基质含有以下重量份比的原料：板栗木屑50份，玉米粉25份，黄沙土25份，MgSO4·7H2O1.1份，CaCO31.1份，KH2PO40.75份，光果甘草提取液8份；所述培养基质pH为5.3；(2)接种、养菌，将血红牛肝菌菌种接种于步骤(1)已灭菌的培养基质中，保持温度22.5℃、湿度80％、CO2浓度1050PPm，遮光培养至培养基质上长满菌丝；(3)覆土，于摇床上按1:3的比例振荡混合黄沙土和菜园土，并添加20％香蕉皮浆，混合均匀，同时喷洒水使土壤水分含量达75％，堆放10d后覆盖于步骤(2)长满菌丝的基质上；(4)覆土层菌丝培养，覆土后保持温度22.5℃、湿度85％、CO2浓度1550PPm，遮光培养至菌丝长至覆土层表面；(5)出菇培养，保持温度24℃、湿度85％、CO2浓度700PPm，光照7.5h/d，光照强度1000lx，直至出菇采收。
实施例3(1)培养基质配制，所述培养基质含有以下重量份比的原料：板栗木屑60份，玉米粉30份，黄沙土30份，MgSO4·7H2O1.6份，CaCO31.4份，KH2PO41份，乌拉尔甘草提取液、光果甘草提取液或胀果甘草提取液10份；所述培养基质pH为5.8；(2)接种、养菌，将血红牛肝菌菌种接种于步骤(1)已灭菌的培养基质中，保持温度25℃、湿度85％、CO2浓度1200PPm，遮光培养至培养基质上长满菌丝；(3)覆土，于摇床上按1:4的比例振荡混合黄沙土和菜园土，并添加25％香蕉皮浆，混合均匀，同时喷洒水使土壤水分含量达80％，堆放12d后覆盖于步骤(2)长满菌丝的基质上；(4)覆土层菌丝培养，覆土后保持温度25℃、湿度90％、CO2浓度1800PPm，遮光培养至菌丝长至覆土层表面；(5)出菇培养，保持温度25℃、湿度90％、CO2浓度800PPm，光照9h/d，光照强度1200lx，直至出菇采收。实施例4(1)培养基质配制，所述培养基质含有以下重量份比的原料：板栗木屑42份，玉米粉28份，黄沙土230份，MgSO4·7H2O0.8份，CaCO31.0份，KH2PO40.8份，甘草提取液9份；所述培养基质pH为5.0；(2)接种、养菌，将血红牛肝菌菌种接种于步骤(1)已灭菌的培养基质中，保持温度23℃、湿度73％、CO2浓度1000PPm，遮光培养至培养基质上长满菌丝；(3)覆土，于摇床上按1:2.5的比例振荡混合黄沙土和菜园土，并添加28％香蕉皮浆，混合均匀，同时喷洒水使土壤水分含量达78％，堆放9d后覆盖于步骤(2)长满菌丝的基质上；(4)覆土层菌丝培养，覆土后保持温度23℃、湿度87％、CO2浓度1600PPm，遮光培养至菌丝长至覆土层表面；(5)出菇培养，保持温度24℃、湿度82％、CO2浓度680PPm，光照7.5h/d，光照强度1100lx，直至出菇采收。实施例1-4的乌拉尔甘草提取液、光果甘草提取液或胀果甘草提取液可以通过以下方法制备：将相应甘草药材粉碎成粗粉，用8-10倍量90-95％乙醇浸泡3-5h，回流提取2-4次，每次3-4h，过滤，合并提取液即可。实施例2-4的香蕉皮浆可以通过以下方法制备：取粉碎的香蕉皮，加入8-12％的高粱，挤压膨化后接种6-8％酵母菌，发酵2.5-3.5d即得香蕉皮浆。对比例1除步骤(1)培养基质中不添加乌拉尔甘草提取液外，其它栽培条件同实施例1。统计实施例1-4及对比例1步骤(1)培养基质上长满菌丝所需时间，结果见表1。表1实施例1-4及对比例1步骤(1)培养基质上长满菌丝所需时间样品时间/d实施例130实施例229实施例329实施例430对比例140从表1结果可知在血红牛肝菌培养基质中加入甘草提取液，可以促进菌丝的生长，缩短菌丝的生长周期。测定实施例1-4及对比例2栽培所得血红牛肝菌中脂肪酸含量，结果见表2。表2实施例1-4及对比例2栽培所得血红牛肝菌中脂肪酸含量从表2结果可知在土壤中加入香蕉皮浆，可以提高菇体内脂肪酸的含量。显然，上述实施例仅是本发明的部分实施例，而不是全部实施例。基于本发明的启示，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式，都属于本发明所保护的范围。
技术特征：
1.一种人工栽培血红牛肝菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)培养基质配制，所述培养基质含有以下重量份比的原料：板栗木屑40-60份，玉米粉20-30份，黄沙土20-30份，MgSO4·7H2O0.6-1.6份，CaCO30.8-1.4份，KH2PO40.5-1份，甘草提取液6-10份；所述培养基质pH为4.8-5.8；
(2)接种、养菌，将血红牛肝菌菌种接种于步骤(1)已灭菌的培养基质中，保持温度20-25℃、湿度75-85％、CO2浓度900-1200PPm，遮光培养至培养基质上长满菌丝；
(3)覆土，于摇床上按1:2-4的比例振荡混合黄沙土和菜园土，同时喷洒水使土壤水分含量达70-80％，堆放8-12d后覆盖于步骤(2)长满菌丝的基质上；
(4)覆土层菌丝培养，覆土后保持温度20-25℃、湿度80-90％、CO2浓度1300-1800PPm，遮光培养至菌丝长至覆土层表面；
(5)出菇培养，保持温度23-25℃、湿度80-90％、CO2浓度600-800PPm，光照6-9h/d，光照强度800-1200lx，直至出菇采收。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述方法步骤(3)土壤中还含有20-30％香蕉皮浆。
3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述香蕉皮浆是通过以下方法制备所得：取粉碎的香蕉皮，加入8-12％的高粱，挤压膨化后接种6-8％酵母菌，发酵2.5-3.5d即得香蕉皮浆。
4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述方法步骤(1)的甘草提取液为乌拉尔甘草提取液、光果甘草提取液或胀果甘草提取液。
5.根据权利要求1-4任一项所述方法，其特征在于，所述方法步骤(1)甘草提取液的提取方法为：将甘草药材粉碎成粗粉，用8-10倍量90-95％乙醇浸泡3-5h，回流提取2-4次，每次3-4h，过滤，合并提取液即可。
技术总结
本发明公开了一种人工栽培血红牛肝菌的方法，包括以下步骤：(1)培养基质配制，所述培养基质含有以下重量份比的原料：板栗木屑40‑60份，玉米粉20‑30份，黄沙土20‑30份，MgSO4·7H2O 0.6‑1.6份，CaCO3 0.8‑1.4份，KH2PO4 0.5‑1份，甘草提取液6‑10份；所述培养基质pH为4.8‑5.8；(2)接种、养菌；(3)覆土；(4)覆土层菌丝培养；(5)出菇培养。本发明的有益效果为：首次提供人工栽培血红牛肝菌的方法，栽培周期短；原料简单，成本低；栽培所得血红牛肝菌脂肪酸含量高；为血红牛肝菌的规模化栽培奠定基础；有望为药用生物活性物质的提取提供充足的原料。
一种黑牛肝菌栽培方法
【专利摘要】本发明涉及一种栽培黑牛肝菌（Phlebopus?portentosus）方法，包括培养基质配制、接种养菌、覆土、覆土层菌丝培养、出菇培养步骤。本发明还涉及一种真菌用培养基质及其黑牛肝菌培养中的用途。
【专利说明】一种黑牛肝菌栽培方法【技术领域】
[0001]本发明涉及一种黑牛肝菌栽培方法，属食用真菌栽培【技术领域】。
【背景技术】 [0002]黑牛肝菌(/%76^ο/7?5.Porieflio1SW1S),又称暗褐网柄牛肝菌,是一种珍贵的热带兼性菌根食用菌，分布于斯里兰卡、越南、印度尼西亚、泰国、巴西、墨西哥、澳大利亚，新西兰及我国云南、广西和海南等地。黑牛肝菌品质鲜嫩、味道鲜美、营养价值丰富、高蛋白、低脂肪，富含17种人体必需氨基酸及丰富的磷、钾、钙、镁、铁、锌等人体必须的矿质元素，是较好的健康食品并具有很好的药用价值，深受消费者喜爱。多数牛肝菌为菌根食用菌。菌根食用菌半人工模拟栽培的过程相当长，需要4~5年，甚至6~7年才能完成。目前仅有少数种类的牛肝菌可进行半人工模拟栽培及人工模拟栽培处于实验室研究状态。如微绒牛肝菌(汉可使用腐生菌的栽培方法来进行人工栽培(Harley & Smith,1983)。褐环粘盖牛肝菌(5^77^用合成的菌根苗密植于经过消毒的围地实现人工栽培，菌根苗栽植至褐环粘盖牛肝菌子实体生长需12个月时间。
[0003]虽然已报道试验成功用栽培腐生菌的方式以及接种凤凰木、咖啡、柚子、芒果寄主树等寄主树进行少量的人工栽培黑牛肝菌，但因栽培方法不成熟，推广难度大产品数量极其有限，目前市场上出售的黑牛肝菌仍采自野生自然生长。由于受气候季节条件的限制产量较少，加上不注重对野生自然生长资源的保护，人为过度采摘导致数量越来越少。因此，在食用真菌栽培领域存在对简便高效的黑牛肝菌栽培方法的迫切需求。
【发明内容】
[0004]本发明提供了一种黑牛肝菌栽培方法以及栽培用培养基质。该培养方法简便，培养时间短，出菇整齐、成熟率高，每瓶收牛肝菌1-2个，产鲜牛肝菌100g-120g，生物效率25.0%，达到了草菇栽培的水平且易于推广。此方法是牛肝菌人工栽培的首创，为下一步实现黑牛肝菌工厂化栽培，快速实现产业化奠定了坚实的基础。
[0005]本发明一方面涉及一种栽培黑牛肝菌/70_Τ--?/7?05.?5.)方法,包括培养基质配制、接种养菌、覆土、覆土层菌丝培养、出菇培养步骤，其中所述培养基质包括:
凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木木片 5.0~10.0 kg 凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木木屑 5.0~10.0 kg
红壤10.0 ~20.0 kg
麦粒5.0~10.0 kg
米糠1.0~5.0 kg
碳_1.0 ~2.0 kg
MgSO410.0 ~20.0 g
KEiPO410.0 ~20.0g
ZnSO410.0 ~20.0g酵母浸出汁10.0~20.0g
pH4.0 ~6.00
[0006]在一个【具体实施方式】中，所述培养基质中凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木料需粉碎成木片，木片规格0.2cm~0.4cmX 1.0 cm~1.5 cm,木片预湿堆制发酵30天-60天；木屑预湿堆制发酵60天-90天，木片及木屑在堆制发酵期内每30天翻堆一次。
[0007]在一个【具体实施方式】中，培养容器为1400ml~1650ml塑料瓶。
[0008]在一个【具体实施方式】中，培养容器为如图1所不的1400ml塑料瓶。
[0009]在一个【具体实施方式】中，培养容器为如图2所不的1650ml塑料瓶。
[0010]在一个【具体实施方式】中，在将培养基质装至培养容器时，在容器口预湿留4 Cm-5cm高度的空间用于菌丝长满基质后覆土培养出菇。
[0011]在一个【具体实施方式】中，接种养菌选自接液体菌种和接固体菌种。
[0012]在一个【具体实施方式】中，养菌条件为:温度27 °C~31 °C，CO2浓度800 PPm-1500PPm，湿度60%-75%，暗光， 培养30天-50天菌丝长满基质。
[0013]在一个【具体实施方式】中，覆土材料为表层60 cm红壤土或深层红壤土，表层30 Cm橡胶园土或果园土，每个菌瓶覆土 250g-300g，覆土层厚度与瓶口平。在还进一步的一个【具体实施方式】中，覆土材料进一步包括加入30% (体积比)湿的草炭土或其他配制的土壤，土壤含水量60%—70%。
[0014]在一个【具体实施方式】中，覆土层菌丝培养条件为:温度27 °C~31 °C，CO2浓度1000 PPm -2000PPm，湿度85%-90%，暗光，培养过程中人工喷雾保持覆土层表面湿润，培养8天-10天菌丝长满覆土层。
[0015]在一个【具体实施方式】中，出菇培养条件为:温度26°C~30°C，CO 2浓度500 PPm-lOOOPPm，湿度90%-95%，用LED自然光源，光照度50LX-250LX，光照时间每天8小时，培养第2天开始出菇，继续培养5天-7天，每个培养瓶可成熟1-2个菇，在菇盖未完全展开时及时米收。
[0016]在一个【具体实施方式】中，整个培养过程在一个培养容器中完成而无需再次移栽。
[0017]在一个【具体实施方式】中，1400ml塑料瓶栽培，每瓶产单菇重80g_120g，平均单菇重100g ； 1650ml塑料瓶栽培，每瓶产单菇重100g_150g，平均单菇重120g (见图3)。
[0018]本发明另一方面涉及一种黑牛肝菌瓶栽方法，包括如下步骤:
(I)培养基配制
用改良的固体培养基配方栽培黑牛肝菌，固体培养基配方及配制方法如下:
a.固体培养基配方:
凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木木片5.0~10.0 kg
凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木木屑5.0~10.0 kg
红壤10.0 ~20.0 kg
麦粒5.0~10.0 kg
米糠1.0~5.0 kg
碳_1.0 ~2.0 kg
MgSO410.0 ~20.0 g
KEiPO410.0 ~20.0gZnSO410.0 ~20.0g
酵母浸出汁10.0~20.0g
pH4.0 ~6.00
[0019]b.原料准备:
bl凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木的原木或枝条粉碎成0.2cm~0.4cmX 1.0 cm~1.5 cm规格的木片及锯末屑，然后预湿、建堆，保持木片及锯末屑含水量60%进行堆制发酵，木片堆制发酵30天-60天，木屑堆制发酵90天-120天，堆制发酵期内每30天翻堆一次，连续2-3次，让木片及锯末屑充分软化、腐熟。
[0020]b2红壤晒干后粉碎为粉末。
[0021]c.配制方法:
准确称量步骤bl已充分发酵的凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木木片及锯末屑各50%，混合均匀，然后均匀拌入步骤b2的红壤粉，堆放10-12小时让土壤均匀吸湿利于彻底灭菌。小麦粒加水浸泡10~12h，滤除多余水份待用。米糠、碳酸钙及浸泡后的小麦粒拌入上述料堆中，MgSO4, KH2PO4, ZnSO4、酵母浸出汁用水溶解后均匀喷洒于料堆中，最后将各种原料均匀混合，基质含水量60.0%，PH 4.0~6.0,即得固体培养基质；
(2)装瓶、灭菌
用1400ml~1650ml大容量塑料瓶做培养瓶(见图1、图2)，将配制好的固体培养基分装于塑料瓶中，1400ml塑料瓶装湿料重0.85 kg, 1650ml塑料瓶装湿料重1.0 kg。装瓶后在基质的中间位置打孔至底部，孔直径2 Cm，瓶`肩至瓶口预留4 cm高的空间(用于菌丝长满基质后覆土培养出菇)，121°C灭菌70分钟，待冷却后备用。
[0022](3)接种、养菌
将预先培养好的黑牛肝菌液体菌种或固体菌种接种于步骤(2)已灭菌的培基中，每瓶接液体菌种20ml或接固体菌种50g。接种后将培养置瓶置于温度27 V~31°C，CO 2浓度800 PPm -1500PPm，湿度60%_75%的培养室，暗光条件下培养30天-50天菌丝长满基质完成养菌阶段。
[0023](4)覆土
菌丝长满基质后必须在菌瓶的表面才能出菇及子实体发育成熟。
[0024]覆土材料1:取表层60 cm红壤土或深层红壤土，表层30 Cm橡胶园土或果园土。红壤土质地均匀，不含沙石，无需过筛。橡胶园土或果园土需过筛，去除沙石。然后将红壤土、橡胶园土或果园土浇水预湿，土壤水分含量达60.0%，堆放10天-30天使土壤均匀吸收水份、松散。
[0025]覆土材料I1:将覆土材料I加入30% (体积比)湿的草炭土,混匀,水份含量60%。
[0026]上述步骤(3)完成菌丝培养的菌瓶，打开瓶盖，将已预湿堆放10天-30天，松散红壤土橡胶园土或其他果园土覆盖于基质表面，每个菌瓶覆土 250g-300g，覆土至与瓶口平，厚度4 cm -5 Cm，覆土后不盖瓶盖，适度抖动瓶子，这样既能使土壤与基质菌丝充分接触，又能保持覆土层适当松紧度保证良好的通气状况，利于牛肝菌菌丝萌发生长并快速进入覆土层，长满覆土层、出菇。
[0027](5)覆土层菌丝培养
步骤(4)覆土后的菌瓶在温度27 °C~31 °C，CO2浓度1000 PPm _2000PPm，湿度85%-90%、暗光的培养房中培养牛肝菌菌丝长入覆土层，除保持培养房空间湿度85%-90%外，还需人工喷雾覆土层料面保持湿润利于菌丝生长，8天-10天后菌丝长至覆土层表面，完成覆土层菌丝培养。
[0028](6)出菇培养
经上述步骤(5 )完成覆土层菌丝培养的菌瓶，从第11天开始将培养房温度降至26°C~30°C, CO 2浓度调至500 PPm -lOOOPPm，湿度90%_95%，光照时间每天8小时，上午9:00至下午5:00进行光照，此条件下培养第2天，菌瓶覆土层面上开始出菇，每个菌瓶可出菇1-50个幼蕾，继续培养5-7天，每个菌瓶可成熟1-2个牛肝菌子实体，在牛肝菌菌盖尚未完全展开时及时采收。1400ml塑料瓶栽培，每瓶产单菇重80g-120g，平均单菇重100g ； 1650ml塑料瓶栽培，每瓶产单菇重100g-150g，平均单菇重120g (见图3)。
[0029]本发明另一方面涉及一种真菌用培养基质，其包括:
凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木木片 5.0~10.0 kg 凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木木屑 5.0~10.0 kg 红壤10.0 ~20.0 kg
麦粒5.0~10.0 kg
米糠1.0~5.0 kg
碳_1.0 ~2.0 kg
MgSO410.0 ~20.0 g
KEiPO410.0 ~20.0g
ZnSO410.0 ~20.0g
酵母浸出汁10.0~20.0g
pH4.0 ~6.00
[0030]在一个【具体实施方式】中，所述培养基质中凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木料需粉碎成木片，木片规格0.2cm~0.4cmX 1.0 cm~1.5 cm,木片预湿堆制发酵30天-60天；木屑预湿堆制发酵60天-90天，木片及木屑在堆制发酵期内每30天翻堆一次。
`[0031]本发明另一方面涉及一种培养基质在黑牛肝菌培养中的用途，所述培养基质包括:
凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木木片5.0~10.0 kg
凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木木屑5.0~10.0 kg
红壤10.0 ~20.0 kg
麦粒5.0~10.0 kg
米糠1.0~5.0 kg
碳酸?丐1.0~2.0 kg
MgSO410.0 ~20.0 g
KEiPO410.0 ~20.0 g
ZnSO410.0 ~20.0 g
酵母浸出汁10.0~20.0 g
pH4.0 ~6.00
[0032]本发明涉及的培养基质的成分包括但不限于凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木木片，凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木木屑，红壤,麦粒,米糠,碳酸钙，MgSO4, KH2PO4,ZnSO4和酵母浸出汁。
[0033]如本文所用，数值范围包括上限值、下限值以及上限值与下限值之间的任意数值。例如，“凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木木片5.0~10.0 kg”指凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木木片的含量可以为5.0 kgU0.0 kg以及5.0 kg与10.0 kg之间的任意数值选项，例如 5.01 kg、6.0 kg、7.5 kg、9.0 kg、9.99 kg 等。
[0034]牛肝菌的腐生能力不强，因此需要一定的基质量保证足够的营养供给菇的生长。本发明提供使用特定培养基质利用大容量培养瓶栽培黑牛肝菌的方法，不但保证了足够的基质量含有的营养供给菇的生长，确保子实体重达到100g以上，而且解决了因栽培基质中含有的粗木片易于将塑料袋戳穿，导致培养期菌袋污染的问题，为下一步实现全自动化的工厂化栽培，实现产业化奠定了坚实的基础。瓶栽黑牛肝菌产业化栽培成功，可极大地满足人们对该种美味食用菌的需求，缓解对野生自然资源的压力，保护生态，具有较高的应用价值、经济意义及社会意义。
(I)培养基配制
用改良的固体培养基配方栽培黑牛肝菌，固体培养基配方及配制方法如下:
a.固体培养基配方:
凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木木片5.0 kg
凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木木屑5.0 kg
红壤10.0 kg
小麦粒5.0 kg
米糠1.0 kg
碳酸钙1.0 kg
MgSO410.0 g
KH2PO410.0g
ZnSO410.0g
酵母浸出汁10.0g
pH4.0。
[0040]b.原料准备:
bl凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木的原木或枝条粉碎成0.3cmX 1.0 cm规格的木片及锯末屑，然后预湿、建堆，保持木片及锯末屑含水量60%进行堆制发酵，木片堆制发酵50天，木屑堆制发酵90天，堆制发酵期内每30天翻堆一次，连续2-3次，让木片及锯末屑充分软化、腐熟。
[0041]b2红壤晒干后粉碎为粉末。
[0042]c.配制方法:
准确称量步骤bl已充分发酵的凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木木片及锯末屑各50%，混合均匀，然后均匀拌入步骤b2的红壤粉，堆放10-12小时让土壤均匀吸湿利于彻底灭菌。小麦粒加水浸泡10~12h，滤除多余水份待用。米糠、碳酸钙及浸泡后的小麦粒拌入上述料堆中，MgSO4, KH2PO4, ZnSO4、酵母浸出汁用水溶解后均匀喷洒于料堆中，最后将各种原料均匀混合，基质含水量60.0%，PH 4.5，即得固体培养基质；
(2)装瓶、灭菌
用1650ml大容量塑料瓶做培养瓶，将配制好的固体培养基分装于塑料瓶中，每瓶装湿料重1.0 kg，装瓶后在基质的中间位置打孔至底部，孔直径2 Cm，瓶肩至瓶口预留4 cm高的空间(用于菌丝长满基质后覆土培养出菇)，121°C灭菌70分钟，待冷却后备用。
[0043](3)接种、养菌
将预先培养好的黑牛肝菌液体菌种或固体菌种接种于步骤(2)已灭菌的培基中，每瓶接液体菌种20ml或接固体菌种50g。接种后将培养置瓶置于温度27 V~29 °C，CO 2浓度800 PPm -lOOOPPm，湿度60%_70%的培养室，暗光条件下培养40天菌丝长满基质完成养菌阶段。
[0044](4)覆土
上述步骤(3)完成菌丝培养的菌瓶，打开瓶盖，将上述覆土材料I预湿堆放30天，松散的红壤土、或橡胶园土或其他果园土覆盖于基质表面，每个菌瓶覆土 260g-300g，覆土至与瓶口平，平均厚度4.5 Cm，覆土后不盖瓶盖，适度抖动瓶子，这样既能使土壤与基质菌丝充分接触，又能保持覆土层适当的松紧度具有良好的通气状况，利于牛肝菌菌丝萌发生长并快速进入覆土层，长满覆土层、出菇。
[0045](5)覆土层菌丝培养
步骤(4)覆土后的菌瓶在温度27 °C~29 °C，CO 2浓度1000 PPm _1500PPm，湿度8 5 %- 9 O %、暗光的培养房中培养牛肝菌菌丝长入覆土层，除保持培养房空间湿度8 5 %- 9 O %外，还需人工喷雾覆土层料面保持湿润利于菌丝生长，10天菌丝长至覆土层表面，完成覆土层菌丝培养。
[0046](6)出燕培养
经上述步骤(5 )完成覆土层菌丝培养的菌瓶，从第11天开始将培养房温度降至26°C~28°CO，0)2浓度调至500 PPm -700PPm，湿度90%_95%，光照时间每天8小时，上午9:00至下午5:00进行光照，此条件下培养第2天，菌瓶覆土层面上开始出菇，每个菌瓶可出菇1-50个幼蕾，继续培养5-7天，每个菌瓶可成熟1-2个牛肝菌子实体，在牛肝菌菌盖尚未完全展开时及时采收，每瓶产单菇重100g-150g，平均每瓶产鲜菇120 g。
[0047]实施例2-3
实施例2-3培养基配制、装瓶灭菌、接种养菌、覆土及覆土层菌丝培养、出菇培养与实施例I相同，不同之处见表1。[0048]表1 实施例1-3不同基质配方及栽培产
【权利要求】
1.一种栽培黑牛肝菌Porieflio1SW1S)方法,包括培养基质配制、接种养菌、覆土、覆土层菌丝培养、出菇培养步骤，其特征在于所述培养基质包括: 凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木木片 5.0~10.0 kg 凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木木屑 5.0~10.0 kg 红壤10.0 ~20.0 kg 麦粒5.0~10.0 kg 米糠1.0~5.0 kg 碳酸钙1.0~2.0 kg MgSO410.0 ~20.0 g KH2PO410.0 ~20.0g ZnSO410.0 ~20.0g 酵母浸出汁10.0~20.0g pH4.0 ~6.0。
2.根据权利要求1的方法，其特征在于所述培养基质中凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木料需粉碎成木片，木片规格0.2cm~0.4cmX 1.0 cm~1.5 cm,木片预湿堆制发酵30天-60天；木屑预湿堆制发酵60天-90天，木片及木屑在堆制发酵期内每30天翻堆一次。
3.根据权利要求1或2的方法，其特征在于培养容器为1400ml~1650ml塑料瓶。
4.根据权利要求3的方法，其特征在于培养容器为如图1所示的1400ml塑料瓶。
5.根据权利要求3的方法，其特征在于培养容器为如图2所示的1650ml塑料瓶。
6.根据权利要求1至5中任一项的方法，其特征在于在将培养基质装至培养容器时，在容器口预湿留4 cm -5 cm高度的空间用于菌丝长满基质后覆土培养出菇。
7.根据权利要求1至6中任一项的方法，其特征在于接种养菌选自接液体菌种和接固体菌种。
8.根据权利要求1至7中任一项的方法，其特征在于养菌条件为:温度27°C~31°C，CO 2浓度800 PPm -1500PPm，湿度60%_75%，暗光，培养30天-50天菌丝长满基质。
9.根据权利要求1至8中任一项的方法，其特征在于覆土材料为表层60cm红壤土或深层红壤土，表层30 cm橡胶园土或果园土，每个菌瓶覆土 250g-300g，覆土层厚度与瓶口平。
10.根据权利要求9的方法，其特征在于覆土材料进一步包括加入30%(体积比)湿的草炭土或其他配制的土壤，土壤含水量60%—70%。
11.根据权利要求1至10中任一项的方法，其特征在于覆土层菌丝培养条件为:温度27°C~31°C，CO2浓度1000 PPm _2000PPm，湿度85%_90%，暗光，培养过程中人工喷雾保持覆土层表面湿润，培养8天-10天菌丝长满覆土层。
12.根据权利要求1至11中任一项的方法，其特征在于出燕培养条件为:温度26°C~30°C, CO2浓度 500 PPm -lOOOPPm，湿度 90%_95%，用 LED 自然光源，光照度 50LX-250LX，光照时间每天8小时，培养第2天开始出菇，继续培养5天-7天，每个培养瓶可成熟1-2个菇，在燕盖未完全展开时及时米收。
13.根据权利要求1至12中任一项的方法，其特征在于整个培养过程在一个培养容器中完成而无需再次移栽。
14.一种真菌用培养基质，其包括:凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木木片 5.0~10.0 kg 凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木木屑 5.0~10.0 kg红壤10.0 ~20.0 kg麦粒5.0~10.0 kg米糠1.0~5.0 kg碳_1.0 ~2.0 kgMgSO410.0 ~20.0 gKEiPO410.0 ~20.0gZnSO410.0 ~20.0g酵母浸出汁10.0~20.0gpH4.0 ~6.00
15.根据权利要求14的培养基质，其中所述培养基质中凤凰木、柚子树、芒果树或其他杂木料需粉碎成木片，木片规格0.2cm~0.4cmX 1.0 cm~1.5cm,木片预湿堆制发酵30天-60天；木屑预湿堆制`发酵60天-90天，木片及木屑在堆制发酵期内每30天翻堆一次。
